Cara Membuat Media TCBS Agar : Media untuk Vibrio (Cara 2)

TCBS : thiosulfat-Citrat-Bile-Sucrose

Bahan :

      1.       Akuades 1000 ml

      2.       Yeast Extract 5 gr

      3.     Bacteriological peptone 10 gr

      4.     Sodium thiosulfat 10 gr
5.     Sodium Klorida 10 g6.     Thymol Blue 0.04 gr7.     Agar 14 gr8.     Sodium Citrate 10 gr9.    Ox Bile 8 gr10.    Sucrose 20 gr11.    Ferric Citrate 1 gr12.    Bromothymol Blue 0,04 gr

          

      Alat :

Neraca Analitik

Spatula

Aluminium Foil

Gelas Ukur

Hotplate Stirrer

Magnetic Stirrer

Erlemeyer

Kapas

Akuades

Autoclave

Cara Pembuatan :

Siapkan 1 di dalam erlemeyer 2 liter

Letakkan di atas hotplate, nyalakan pada suhu 80-90oC. Aduk secara terus menerus dengan menggunakan magnetic stirrer.

Timbang 2 di atas aluminium foil.

Masukkan 2 ke dalam erlemeyer.

Timbang 3 di atas aluminium foil.

Masukkan 3 ke dalam erlemeyer.

Timbang 4 di atas aluminium foil.

Masukkan 4 ke dalam erlemeyer.

Timbang 5 di atas aluminium foil.

Masukkan 5 ke dalam erlemeyer.

Timbang 6 di atas aluminium foil.

Masukkan 6 ke dalam erlemeyer.

Timbang 7 di atas aluminium foil.

Masukkan 7 ke dalam erlemeyer.

Timbang 8 di atas aluminium foil.

Masukkan 8 ke dalam erlemeyer.

Timbang 9 di atas aluminium foil.

Masukkan 9 ke dalam erlemeyer.

Timbang 10 di atas aluminium foil.

Masukkan 10 ke dalam erlemeyer.

Timbang 11 di atas aluminium foil.

Masukkan 11 ke dalam erlemeyer.

Timbang 12 di atas aluminium foil.

Masukkan 12 ke dalam erlemeyer.

Apabila campuran telah larut homogen, naikkan suhu sampai mendidih dan homogen.

Tutup erlemeyer dengan kapas.

Bungkus dengan kertas.

JANGAN DI AUTOCLAVE.

langsung gunakan, atau simpan di dalam tempat yang dingin (kulkas).

Penggunaan :
Tuangkan media ke cawan petri. Diamkan hingga mengeras.
Olesi dengan sampel.
Inkubasi selama 18-24 jam pada suhu 35oC untuk sampel klinis. Atau suhu lebih rendah untuk sampel lingkungan.
Koloni Vibrio cholerae akan berwarna kuning, dan berubah menjadi kehijauan apabila dipindah ke suhu ruang.

Penyimpanan :

Media yang telah dibuat dapart disimpan pada suhu 2-8oC.

Peringatan :
Identifikasi berbagai spesies Vibrio melalui media TCBS bersifat dugaan dan dibutuhkan uji lanjutan untuk konfirmasi/penguat.

Catatan :

*) Pemanasan yang terlalu tinggi akan menyebabkan campuran mendidih dan meluap; selain itu zat terlarut yang berada di dasar erlemeyer akan mengerak.

**) Jika autoclave tidak memiliki setting otomatis, maka nyalakan autoclave sampai suhu mencapai 121oC. Kemudian diamkan dalam suhu tersebut selama 15 menit, lalu matikan.

***) pH media akan berada di rentang 8,6 + 0,2 pada 25oC.

Referensi : 
Produsen Bahan Mikrobiologi  http://www.oxoid.com/uk/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0333&org=146&c=uk&lang=en