Cara Membuat Media BLOOD AGAR BASE : Media untuk analisa Mikrobiologi (Cara 2)

Cara Membuat Larutan Blood Agar Base

Bahan :

1.       Akuades 1000 ml

2.       Agar 15 gr

3.       Nutrient substrate (heart extract and peptone) 20 gr

4.       NaCl 5 gr

Alat :

Neraca Analitik

Spatula

Aluminium Foil

Gelas Ukur

Hotplate Stirrer

Magnetic Stirrer

Erlemeyer

Kapas

Akuades

Autoclave

Cara Pembuatan :

Siapkan 1 di dalam erlemeyer 2 liter

Letakkan di atas hotplate, nyalakan pada suhu 80-90oC. Aduk secara terus menerus.

Timbang 2 di atas aluminium foil.

Masukkan 2 ke dalam erlemeyer.

Timbang 3 di atas aluminium foil.

Masukkan 3 ke dalam erlemeyer.

Timbang 4 di atas aluminium foil.

Masukkan 4 ke dalam erlemeyer.

Timbang 5 di atas aluminium foil.

Masukkan 5 ke dalam erlemeyer.

Setelah 10-15 menit, turunkan.

 Tuangkan filtratnya ke dalam erlemeyer 2000 ml.

Tutup erlemeyer dengan menggunakan kapas.

Tutup kembali dengan menggunakan kertas dan karet.

Masukkan ke dalam autoclave, nyalakan autoclave.

Setting autoclave pada suhu 121oC, 15 menit. **)

Setelah Autoclave mati, diamkan sampai suhu turun mencapai 100oC (tekanan udara normal).

Buka autoclave, keluarkan larutan yang telah steril.

Diamkan sampai larutan mencapai suhu 45-50oC.

Tambahkan 5-8 % sterile defebrinated blood

Aduk untuk menghilangkan gelembung

Tuangkan ke dalam cawan steril untuk membuat lapisan tipis media.

Dinginkan, simpan di dalam tempat yang dingin (kulkas).

Catatan :

*) Pemanasan yang terlalu tinggi akan menyebabkan campuran mendidih dan meluap; selain itu zat terlarut yang berada di dasar erlemeyer akan mengerak.

**) Jika autoclave tidak memiliki setting otomatis, maka nyalakan autoclave sampai suhu mencapai 121oC. Kemudian diamkan dalam suhu tersebut selama 15 menit, lalu matikan.

***) Larutan memiliki pH 6,8 + 0,2 pada 25oC

Referensi :
Label Informasi pada botol kemasan bahan Blood Agar Base dengan merk dagang Merck.